授權公告号：CN107287230B

授權公告日：2020.10.13

申請号：2017106563102

申請日：2017.08.03

同一申請的已公布的文獻号：CN107287230A

申請公布日：2017.10.24

專利權人：沈陽農業大學(xué)

發(fā)明人：安迎鋒;高和瑞;高嵩;張藝鋒;許淑敏;劉霞

摘要：

本發(fā)明涉及基因工程領域，具體的說(shuō)是一歌線種(zhǒng)兼具定向(xiàng)TA理現克隆，無背景粘性末端克隆和表達功能(néng)的質粒載體及其構拍林建方法。質粒載體爲閉合環狀的雙鏈DN動機A，含有兩(liǎng)個多克隆位點區，在兩(liǎng)也文個多克隆位點區之間存在一個ccdB表達框，可在多數大腸杆菌菌株中組成(讀小chéng)型表達毒性蛋白ccdB農如，作爲負篩選标記。基于質粒載體的多克隆位點的設計，該質粒可用于進他刀(jìn)行定向(xiàng)TA克隆和改進(jìn)的無背景粘性末端克隆。喝呢另外，本質粒載體還(hái)可以直接用于蛋白表達和純化。各功能(路樂néng)均得到驗證。本發(f身黃ā)明所涉及的質粒載體因其更方便和高效也冷，將(jiāng)在基因工程領域發(fā)揮重要的黃們作用。